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천연물 추출 방법의 하나인 열수 추출은 물을 용매로 하여 추출하는 것으로 안전하고 경제적인 방법이다. 본 연구에서는 LPS 유도 RAW264.7 세포에 머위 잎 열수 추출물(KP- 1)을 처리하여 항염증 활성을 평가하였다. KP-1은 LPS 처리 여부에 상관없이 25, 50, 100 μg/mL 농도 모두 세포독성을 보이지 않았다. LPS 매개 염증 관련 인자인 NO, PGE2, ROS를 측정한 결과 KP-1(50, 100 μg/mL)을 처리한 군에서는 LPS 단독 처리군과 비교하여 NO 생성이 유의하게 감소하였다. PGE2의 경우 KP-1 50 μg/mL에서 감소하는 경향이 있었고, 100 μg/mL에서는 PGE2 수준이 유의하게 감소하였다. 또한, LPS로 ROS 발생이 증가했을 때 KP-1을 처리한 세포에서는 ROS 생성이 모든 농도에서 유의하게 감소하였다. 한편 HPLC 분석 결과 KP-1의 FA 함량은 26.57 mg/g이었다. KP-1의 항염증 활성에 영향을 미치는 요인을 알아보기 위해 FA의 NO 및 ROS 억제 활성을 평가한 결과, FA 50 μg/mL에서 NO 생성이 감소하는 경향을 보였다(P= 0.073). 그리고 ROS 수준은 25, 50 μg/mL 농도에서 유의하게 감소하여 대조군과 차이를 나타내었다. 본 연구 결과 머위 잎 열수 추출물은 NO, PGE2, ROS 수준을 억제하여 LPS 유도 대식세포에서 항염증 활성이 있다고 판단하며, 추후 머위 잎을 이용한 건강기능식품 개발 시 이를 기초 자료로 활용할 수 있을 것으로 기대한다.
Petasites japonicus has been widely used as a medicinal herb in Korea, Japan, and China. This study investigated the anti-inflammatory activity of hot water extracts of P. japonicus leaves (KP-1) on lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW264.7 cells. LPS stimulates the differentiation of monocytes into macrophages and it induces the pro-inflammatory mediators such as nitric oxide (NO), prostaglandin E2 (PGE2), reactive oxygen species (ROS), and cytokines. The results determined that KP-1 did not influence the cytotoxicity of macrophages at 25, 50, and 100 μg/mL. Also, pre-treatment with KP-1 significantly reduced the production of NO and PGE2, and dose-dependently attenuated the ROS levels in the LPS-stimulated cells. In addition, the study evaluated whether fukinolic acid (FA) isolated from KP-1 contributes to the anti-inflammatory properties of KP-1. As a result, FA treatment showed a tendency toward decreased NO production, and inhibited the generation of ROS in activated macrophages. The results suggest that KP-1 has anti-inflammatory activity on the LPS-mediated inflammatory response and may be suitable for the development of potential functional foods.
